Akut Myeloid Lösemi (AML), yetişkinlerde en yaygın lösemi formudur ve AML teşhisi konan her 3 kişiden 1'inde FLT3 aktive edici mutasyonların bulunması beklenir. AML'de FLT3 aktive edici mutasyonların varlığı, kötü bir prognoza işaret eder ve bazı tedavi rejimleri ve hedefli ilaç denemelerine yalnızca mutasyon için pozitif hastalar erişebilir. Bu nedenle, yanlış bir negatif FLT3 test sonucu hasta için ciddi sonuçlar doğurabilir. FLT3 testinin AML hastalarının yaşamları üzerindeki önemli etkisi nedeniyle, LeukoStrat CDx FLT3 Mutasyon Testi, AML hastaları için en kritik öneme sahip biyobelirteç testlerinden birini temsil eder.
LeukoStrat CDx FLT3 Mutasyon Testi, otomatik mutasyon tanımlaması, mutant wild-type sinyal oranı raporları ve klinik yorumlama ile FLT3 ITD ve FLT3 TKD tespiti için eksiksiz bir çözümdür.
Akut miyeloid lösemi (AML) teşhisi konan hastaların periferik kanlarından elde edilen mononükleer hücrelerdenveya kemik iliği aspiratlarından ekstrakte edilen genomik DNA'dan FLT3 genindeki dahili tandem duplikasyonları (ITD) ve tirozin kinaz alanı (TKD) mutasyonları D835 ve I836'yı saptamak için tasarlanmış, PCR tabanlı CE-IVD onaylı bir testtir.LeukoStrat CDx FLT3 Mutasyon testi gibi onaylanmış bir testle FLT3 mutasyonlarının doğrulanmasının ardından hastalara TKI tedavisi verilebilir.
LeukoStrat® CDx FLT3 Mutasyon Testi, FLT3 mutasyonlarının mevcut olup olmadığını belirlemek için mononükleer hücreleri izole etmek ve hasta örneklerinden DNA çıkarmak için reaktifler, ekipman, yazılım ve prosedürleri içerir. DNA, PCR yoluyla amplifiye edilir ve amplikonlar, kapiler elektroforez yoluyla saptanır. FLT3 mutasyon durumu, LeukoStrat® CDx FLT3 Yazılımı tarafından belirlenir.
LeukoStrat® CDx FLT3 Mutasyon Testi, FLT3 mutasyonlu AML hastaları için tedavi kararları vermede uzman hekimlere yardımcı olmayı amaçlamaktadır.
FLT3 ITD mutasyonlarına, FLT3 geninin juxtamembrane (JM) bölgesinin içindeki ve çevresindeki bölgeyi içeren FLT3 geninin bir bölümünün duplikasyonu ve insersiyonu neden olur. Bu mutasyonlar, eklenen kopyalanmış DNA dizisinin hem konumu hem de uzunluğu bakımından farklılık gösterir. ITD mutasyonları, yapısal otofosforilasyon ve FLT3'ün aktivasyonu ile sonuçlanır.LeukoStrat®CDx FLT3 Mutasyon Testi, JM bölgesinin içinde ve çevresinde bulunan primerleri kullanır. Forward ve reverse PCR primerleri, numune sinyalinin varlığını doğrulamaya yarayan farklı floroforlarla floresan olarak etiketlenir. Wild tip FLT3 alelleri, bu testte ölçüldüğü gibi 327±1 bp'de bir ürünü çoğaltacak ve üretecek, ITD mutasyonları içeren aleller ise 327±1 bp'yi aşan bir ürün üretecektir.
FLT3 TKD mutasyonlarına, bu yüksek oranda korunmuş katalitik merkezdeki amino asit dizisinde bir değişiklikle sonuçlanan nükleik asit değişiklikleri ve/veya delesyonları neden olur. D835 ve I836 değişimleri gibi TKD mutasyonları, FLT3'ün yapısal otofosforilasyonu ve aktivasyonu ile sonuçlanır.FLT3 geninin wild tip alelleri, bir EcoRV enzim kesim bölgesini içerir. Bir nükleik asit değişimi meydana geldiğinde, enzim kesim tanıma bölgesi kaybolur ve EcoRV endonükleazı bu bölgedeki DNA'yı tanımlayamaz ve kesemez. LeukoStrat® CDx FLT3 Mutasyon Testi, TKD bölgesinin her iki tarafında bulunan primerleri kullanır. FLT3 hedef bölgesi, PCR kullanılarak amplifiye edilir ve ardından bir EcoRV enzim kesimi gerçekleşir. PCR primerlerinden biri bir florofor ile etiketlenir ve diğeri, tasarlanmış bir EcoRV kesim bölgesi içerir, böylece hem wild type hem de mutant aleller kesilir. Kesim modeli, normal gen dizisinin kaybını tanımlar ve kesimin gerçekleşmesini sağlar. FLT3 geninin wildtype alelleri, 79±1 bp'lik kesim ürünleri verirken, mutant aleller, 145±1 bp veya 147±1 bp'lik orijinal kesilmemiş amplikon ürününden 125±1 bp veya 127±1 bp'lik ürünler verir.
LeukoStrat CDx FLT3 Mutasyon Testi, AML hastalarında FLT3 genindeki ITD ve TKD mutasyonlarının tespiti için geçerliliği olan global olarak standartlaştırılmış bir testtir.
BİZİMLE İLETİŞİME GEÇİN
